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Virginie Lemoine a fait ses études d’art dramatique au conservatoire de Rouen (1979/82).

Elle crée en 1982 Les Ginettes (auteure des textes et interprétation). Elle fait ainsi la première partie de Juliette Gréco, Marie-Paule belle ou Nancy Holloway. Elle écrit et joue 100 % polyamide au Théâtre des Blancs Manteaux. Elle intègre de 1987 à 1989 la troupe du Théâtre du Hangar (Salon de Provence) avec laquelle elle fait plusieurs tournées et festivals d’Avignon.

Elle joue diverses comédies, et rejoint l’équipe du « Vrai Faux journal » de Claude Villers sur France Inter de 1990 à 1993. (Elle travaillera sur la chaîne plus de 10 ans avec notamment Laurent Ruquier, Laurence Boccolini, Stéphane Bern ou Yves Lecoq) Elle noue une amitié fondamentale avec Laurent Ruquier, qui la présente à Jacques Martin (avec lequel elle collabore de 1991 à 1994), et la met en contact avec Laurent Gerra (avec lequel elle crée un Duo de 1992 à 1998). Laurent Gerra et Virginie Lemoine font de nombreuses émissions à la télévision (notamment « Les Zap’tualités », rubrique quotidienne sur France 2 sous la houlette de Michel Drucker). En 1997 elle reçoit un Molière, et le prix d’humour de la sacem pour le Duo qu’elle forme avec Laurent Gerra. En 1999, elle met fin au Duo et anime « La grosse émission » sur la chaîne Comédie.

Puis elle se consacre à sa carrière de comédienne. Elle incarne de nombreux rôles au théâtre à Paris et en tournée (entre autre Mariages et conséquences, Les désirs sauvages de mon mari m’ont presque rendue folle, Les monologues du vagin, Un beau salaud, Un banc à l’ombre, Coiffure pour dames, Si c’était à refaire). En 2018 elle joue dans Comme en 14 de Dany Laurent, m.e.s. Yves Pignot

Elle tourne pour le cinéma et la télévision, et incarne « Marion Ferrière » l’héroïne de la série Famille d’accueil de 2001 à 2015.

Depuis 2008, Virginie écrit et met en scène plusieurs pièces de théâtre : Une diva à Sarcelles (nommée aux Molière et prix du meilleur spectacle musical - éditions du festival off d’Avignon), Brigitte directeur d’agence, Les Maurice girls. Elle adapte et met en scène avec Marie Chevalot Le bal d’Irène Némirovsky (créé en 2012 et actuellement en tournée). Elle met en scène 31 (créé en 2016 en Avignon et à Paris au Studio des ChampsÉlysées) : 6 nominations aux Trophées des comédies Musicales dont Meilleure mise en scène.

Chagrin pour soi (co-écrit avec Sophie Forte) est sa sixième mise en scène.